Al primo piano del museo ben quattro sale sono dedicate a ricostruzione di ambienti di fine Ottocento e inizio Novecento. Tra questi troviamo un ambulatorio medico, un laboratorio ed una sala autoptica.
Si rappresenta il tempo del Positivismo che conquista l’intera scuola medica napoletana con maestri quali Antonio Cardarelli e Giuseppe Moscati. A quest’ultimo appartengono molti oggetti del percorso, scrivanie microscopi, e le bacheche e i pannelli che illustrano la vita e le ricerche del medico Santo che ben seppe coniugare la scienza e la carità cristiana. Ricette e scritti del clinico raccontano di come ponesse attenzione al paziente come persona da curare e da sostenere anche nello spirito.